Effets de N

Rapports scientifiques volume 13, Numéro d'article : 12502 (2023) Citer cet article

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Étudier l'effet de l'antioxydant N-acétylcystéine (NAC) sur la prolifération et l'apoptose des cellules embryonnaires de drosophile S2 interférant avec le gène CG8005 en éliminant les espèces réactives de l'oxygène (ROS) intracellulaires. L'efficacité interférente du gène CG8005 dans les cellules embryonnaires de drosophile S2 a été vérifiée par PCR quantitative en temps réel (qRT-PCR). Différentes concentrations de NAC et de solution saline tamponnée au phosphate (PBS) ont été utilisées pour affecter les cellules embryonnaires de drosophile S2. L’état de croissance des cellules embryonnaires de Drosophila S2 a été observé au microscope optique. Deux sondes dihydroéthidium (DHE) et 2,7-dichlorodihydrofluorescéine-acétoacétate (DCFH-DA) ont été utilisées pour observer la production de ROS dans chaque groupe après coloration par immunofluorescence. La coloration TUNEL et la cytométrie en flux ont été utilisées pour étudier le niveau d'apoptose des embryons de drosophile S2, et CCK-8 (Cell Counting Kit-8) a été utilisé pour détecter la viabilité cellulaire des embryons de drosophile S2. L'efficacité d'inactivation du fragment siCG8005-2 était élevée et stable, ce qui a été vérifié par l'efficacité d'interférence (P < 0,05). Il n'y a eu aucun changement significatif dans la croissance des cellules embryonnaires de Drosophila S2 après le traitement par NAC par rapport au groupe PBS. De plus, l'inactivation du gène CG8005 a entraîné une augmentation des ROS et de l'apoptose dans les cellules embryonnaires de drosophile S2 (P < 0,05) ainsi qu'une diminution de l'activité de prolifération (P < 0,05). De plus, le prétraitement de l'antioxydant NAC pourrait inhiber la production de ROS dans les cellules embryonnaires de drosophile S2 (P < 0,05), réduire l'apoptose cellulaire (P < 0,05) et améliorer la survie cellulaire (P < 0,05). Le gène CG8005 dans les cellules embryonnaires de drosophile S2 pourrait réguler la prolifération et l'apoptose des cellules embryonnaires S2 en perturbant l'homéostasie rédox, et la NAC antioxydante pourrait inhiber l'apoptose cellulaire et favoriser la prolifération cellulaire en éliminant les ROS dans les cellules embryonnaires de drosophile S2, ce qui devrait fournir de nouveaux aperçus de la pathogenèse de l'infertilité masculine et de la spermatogenèse.

L'homéostasie rédox intracellulaire, qui fait référence à l'équilibre dynamique entre les espèces oxydantes et réductrices, joue un rôle essentiel dans le maintien des processus physiologiques normaux, notamment la croissance cellulaire, le métabolisme, l'apoptose et la prolifération1,2. Lorsque le corps est soumis à des stimuli nocifs, le système oxydatif et le système antioxydant sont déséquilibrés et ont alors tendance à être oxydatifs, entraînant ainsi une infiltration de neutrophiles, une sécrétion de protéases et une production d'un grand nombre d'intermédiaires oxydatifs3,4. Les espèces réactives de l'oxygène (ROS) sont un terme général désignant les composés actifs contenant de l'oxygène, notamment le radical hydroxyle (·OH), le peroxyde d'hydrogène (H2O2) et le radical superoxyde (O2−), générés au cours du processus de métabolisme oxydatif. . Dans des conditions normales, le corps peut produire une petite quantité de ROS pour maintenir l’équilibre du métabolisme de l’oxygène sous l’effet d’enzymes piégeurs de radicaux libres et d’antioxydants8,9. Cependant, une grande quantité de ROS peut être produite après des stimuli nocifs, ce qui provoque une perturbation de l’homéostasie rédox et contribue finalement à l’apparition d’un stress oxydatif10. Au cours des dernières années, de plus en plus de preuves ont montré que le stress oxydatif est étroitement impliqué dans l’apparition de la prolifération cellulaire et de l’apoptose. Le traitement des oxydants peut induire l’apoptose et inhiber la prolifération cellulaire, tandis que l’utilisation d’antioxydants peut réduire l’apoptose et augmenter la viabilité cellulaire11,12. La N-acétylcystéine (NAC), un précurseur d'antioxydant et de glutathion (GSH) contenant du thiol, pourrait atténuer le stress oxydatif en éliminant les radicaux libres et en stimulant l'activité des enzymes antioxydantes13,14. Il existe un rapport selon lequel l'utilisation de NAC a également été associée à une réduction significative de la peroxydation lipidique et à une augmentation significative des taux de GSH dans le foie et les érythrocytes de souris15.